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    简阳大耳羊群繁殖的新技术
    作者:简单大耳羊www.deryang.com 发布于:2015-11-01 13:26:48 点击量:

    简阳大耳羊群繁殖的新技术
     

    随着科学技术的不断发展进步,利用羊的繁殖生理原理, 在羊的繁殖过程中采用同期发情、冷冻精液、超数排卵与胚胎 移植及早期妊娠诊断等先进新技术,可以加快羊的繁殖和育种工作,大大提高了简阳大耳羊的生产水平和生产能力。 

    一、同期发情 同期发情技术就是利用某些激素人为地控制和调整母羊自然的发情周期,使一群母羊中的绝大多数按计划在几天时间内集中发情。同期发情有利于推广人工授精。特别是在居住分散的山区,如果能在短时间内使羊群集中发情,集中进行 人工授精就非常便利。同期发情,集中配种,可以缩短配种季节,节省大量的人力物力。同时又因配种同期化,对以后的分娩产羔、羊群周转以及商品羊的成批生产等一系列的组织管理带来方便,适应现代集约化生产或工厂化生产的要求。同期发情有两种方法:一种方法是促进黄体退化,从而降 低孕激素水平;另一种方法是抑制发情,增加孕激素水平。两种方法所用的激素性质、作用各不相同,但都是改变母羊体内孕激素水平,达到发情同期化的目的。 

    (一)促进黄体退化法 应用前列腺素PCF(2a)及其类似物使黄体溶解,从而使黄体期中断,停止分泌孕酮,再配合使用促性腺激素,引起母羊发情。用于同期发情的国产前列腺素F型以及类似物有15甲基PGF(2a)前列烯醇和PCF(la)甲酯等。进口的有高效的氯前列 烯醇和氟前列烯醇等。前列腺素的施用方法是直接注入子宫颈或肌肉注射。注入子宫颈的用量为1~2毫克;肌肉注射一般为0.5毫克。应用国产的氯前列烯醇(又名80996)时,在每只母羊颈部肌肉 注射2毫升含0.2毫克的氯前列烯醇,1~5天内可获得90% 以上的同期发情率,效果十分显著。 前列腺素对处于发情周期5天以前的新生黄体溶解作用不大,因此前列腺素处理法对少数母羊无作用,应对这些无反应的羊进行第二次处理。还应注意,由于前列腺素有溶解黄 体的作用,已怀孕母羊会因孕激素减少而发生流产,因此要在确认母羊属于空怀时才能使用前列腺素处理。 

    (二)孕激素处理法 向待处理的母羊施用孕激素,用外源孕激素继续维持黄体分泌孕酮的作用,造成人为的黄体期而达到发情同期化。为了提高同期率,孕激素处理停药后,常配合使用能促使卵泡发育的孕马血清(PMSG)。现在已能人工合成多种制剂的孕酮类似物质,主要有甲孕酮(MAP)、甲地孕酮(MA)、氯地孕酮(CAP)、氟孕酮(FGA)、18甲基炔诺酮、16次甲基甲地孕酮(MGA)等。不同种类药物的用量是:孕酮150~300毫克;甲孕酮40~60毫克;甲地孕酮80~150毫克;氟孕酮30~60毫克;18甲基炔诺酮30~40毫克。这些人工合成的孕激素,其功能与孕酮类似,但其效率往往还大于孕酮,同时有乳剂、丸剂、粉剂等不同剂型。由于剂型不同,孕激素给药处理的方法有口服、肌肉注射、皮下埋植和阴道栓塞等。 1.口服孕激素 每日将定量的孕激素药物拌在饲料内,通过母羊采食服用,持续12~14天,因此每日用药量除甲孕酮外应是前述药物用量的1/5~17/10,并要求药物与饲料搅拌均匀,使采食量相对一致。最后一天口服停药后,随即注射孕马血清400~750国际单位。 2.肌肉注射 一般油剂常用于肌肉注射。每日按一定药物用量注射到处理羊的皮下或肌肉内,持续10~12天后停药。这种方法剂量易控制,也较准确,但需每日操作处理,比较麻烦。国内生产的肌注“三合激素”只处理1~3天,大大减少了操作日程,较为方便。 3.阴道栓塞法 将乳剂或其他剂型的孕激素按剂量制成悬浮液,然后用泡沫海绵浸取一定药液,或用表面敷有硅橡胶,其中包含一定量孕激素制剂的硅橡胶环构成的阴道栓,用尼龙细线把阴道栓连起来,塞进阴道深处子宫颈外口,尼龙细线的另一端留在阴户外,以便停药时拉出栓塞物。阴道栓一般在14~16天后取出,也可以施以9~12天的短期处理或16~18天的长期处理。但孕激素处理时间过长,对受胎率有一定影响。为了提高发情同期率,在取出栓塞物的当天可以肌肉注射孕马血清400~750国际单位。 4.皮下埋植法 一般丸剂可直接用于皮下埋植,或将一定量的孕激素制剂装入管壁有小孔的塑料细管中,用专门的埋植器将药丸或药管埋在羊耳背皮下,经过15天左右取出药物,同时注射孕马血清500~800国际单位。人工合成的孕激素,即外源孕激素作用期太长,将改变母羊生殖道环境,使受胎率有所降低,因此可以在药物处理后的第一个情期过程中不配种,待第二个发情期出现时再实施配种,这样既有相当高的发情同期率,受胎率也不会受影响。 

    二、冷冻精液及其应用 

    (一)冷冻精液的原理 常温或低温保存的精液,精于仍有代谢作用,所以保存的时间不会太长。现在已能将精液保存温度降到冰点以下,使精液冷冻起来,完全停止代谢作用,从而使精液保存几个月甚至长达几十年。冷冻精液保存时间长,远距离运输方便,对普及人工授精,扩大优秀公羊的利用率起着非常重要的作用。冷冻精液的冷冻源有两种:一种是干冰,即固体二氧化碳,其致冷温度为-78℃。一般用保温瓶或冰瓶作容器;另一种是液态氮气,其致冷温度达-196℃,因此必须要用液氮罐贮存。由于精液是在冰点以下的温度中保存,精子的细胞液和细胞质可能会因渗透压不同而冰点下降度不同。细胞液和细胞质在通过冰点时不能同时冻结造成精子细胞成分分离,从而打击精子活力,形成不可逆的冷休克。冷冻精液的冷打击温度为0~-40℃,。为了减少打击温度对精子的伤害,冷冻精液的稀释液应含有甘油保护成分,其稀释倍数、稀释次数及稀释方法均与常温或低温保存相同。 科学家们研究发现,稀释液中如果含有甘油,就可避免精子发生冷休克,顺利地通过滴冻过程中的冷打击温度。一般甘油含量为稀释液容量的7%~10%。冷冻精液稀释多采用“卵黄~柠檬酸盐一甘油”,或“卵黄~糖一甘油”稀释液。为减少甘油对精子的有害作用,先以不含甘油的稀释液将精液稀释至最后倍数的一半,经1~2小时缓慢降温至5℃,再用含甘油的稀释液进行第二次稀释。精液经过两次稀释后,含甘油的稀释液对精液起作用需要一定时间,使甘油渗透到精子体内,达到渗透活性物质平衡,使精子具有抗冻能力。处理方法是把精液放进5℃冰箱内平衡2~5小时。 

    (二)冷冻精液的方法 根据不同冷源和分装方式,冻结方法有下列两类: 1.干冰埋藏法 颗粒滴冻:是用干冰为冷源制作颗粒冻精的方法。在盛满干冰的容器中,用模板在干冰表面上压孔,孔径为0.5厘米,深2~3厘米。用滴管把平衡好的精液按0.1或0.2毫升的量滴入干冰孔窝内,再用干冰封埋2~4分钟后移液氮或干冰内贮存。 2.液氮熏蒸法 (1)颗粒滴冻 在装液氮的容器上放一铜纱网,距液氮面1~3厘米预冷几分钟,把经平衡处理的精液按定量均匀地滴在纱网上过2~4分钟,待冻精颗粒变白时再收集到贮精瓶内,移入液氯罐中保存。滴冻过程中,可用消毒铝饭盒盖替代铜纱网。 (2)细管、安瓿分装 精液可采用颗粒滴冻的相同方法处理。 

    (三)解冻方法 细管、安瓿分装的冻精,可以直接在35~40℃的温水中解冻,只等细管或安瓿内的精液融化一半时,便可以从温水中取出来以备使用。解冻颗粒精液有干湿两种方法: 1.湿法解冻 是在灭菌试管内注入1毫升1.9%柠檬酸钠解冻液,将试管在水浴中加热至35~40℃,取出颗粒精液 投进试管内,摇动融化以备使用。 2.干法解冻 是直接将颗粒冻精置于灭菌试管内,然后在水浴中加热至35~40℃解冻即可。冷冻精液解冻后立即进行镜检,活力达到0.3以上的就可以用于输精。要提高冻精的受胎率,一般采用1:1的低倍稀释,40℃干法快速解冻,1亿左右有效精子数的大量输精和一个情期二次重复输精等方法。

    三,超数排卵与胚胎移植 

    (一)超数排卵 促卵泡素(FSH)能促使卵泡发育,促黄体素(LH)能引起排卵,使用有这些功能的促性腺激素类似物处理繁殖母羊,使其在未经处理时每个情期中只排1~7个卵的基础上增加排卵数量,这就是超数排卵技术,简称“超排”。超数排卵处理可使母羊在一个情期内排出20个卵,个别母羊可高达50个卵。促使母羊超排的最佳时间是在发情周期的第12~13天,在羊颈静脉注射促卵泡素(FSH)200~300国际单位,静脉注射促黄体素(LH)100~150国际单位,可获得超排效果。还可以使用促卵泡素(FSH)的类似替代物孕马血清(PMSG)和 促黄体素(LH)的类似替代物绒毛膜促性腺激素(HCG),同样在母羊发情周期的第12~13天,根据体重大小皮下注射孕马 血清(PMSG)600~1100国际单位,出现发情表现后再注射绒 毛膜促性腺激素(HCG)500~700国际单位。如果没有孕马血清的制成品,可采妊娠50~90天期间的孕马全血注射,一般每毫升孕马全血含有50~200国际单位,由此可以推算全血用量。超数排卵的目的在于输精后能获得较多的受精卵,将其移植即可“借腹怀胎”形成新的个体,因此超数排卵只是胚胎移植的环节之一。 

    (二)胚胎移植 1.胚胎移植的意义 从一头母畜的输卵管或子宫内取出早期的胚胎(受精卵)移植到另一头母畜的输卵管或子宫内,让其“借腹怀胎”继续生长发育的过程就是胚胎移植,简称“胚移”。提供胚胎的畜体称为“供体”,接受胚胎的畜体称为“受体”。结合超数排卵技术,胚移可以迅速繁殖优良品种的后代,扩大纯种数量。胚移还可以扩大繁殖具有特种经济价值的家畜,如卡拉库尔羊羔皮经济价值很高,为此可通过胚移让其他种类的母羊怀胎生产卡拉库尔羔羊。还可以利用胚移技术将受精卵移植到家兔生殖道内进行长距离运输,然后再移植到母羊子宫内,这样可以减少胚胎损失,降低运输成本。2.胚胎移植的技术环节胚移的主要技术环节就是收集胚胎和移植胚胎。 (1)收集胚胎 配种后3~8天内对供体母羊施行外科手术,在腹中线适当部位切开腹壁取出输卵管。从子宫角上端注射生理盐水或若干等渗生理缓冲溶液(简称冲洗液),并将冲洗液挤入子宫~输卵管连接部,为此在输卵管伞部插入直径2.5毫米的塑料管,用镊子固定输卵管,将冲洗液沿子宫至输卵管倒挤出来,用表面皿收集液体和胚胎。 (2)移植胚胎 接纳胚胎的受体母羊应和供体母羊一起做同期发情处理,使二者的发情时间相同或接近。移植胚胎的方法同样是在受体腹中线适当部位切开腹壁,找到排卵一侧的卵巢,如黄体发育良好,将胚胎注射到同侧子宫角上端或 输卵管壶腹内。目前,国外已可用非手术法进行胚移,只需在供体母羊腹部切一小口,利用内窥镜从供体母羊体内收集受精卵,然后移植到受体子宫即可。